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細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)
簡(jiǎn)要描述：
細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)室通過(guò)檢測(cè)兩個(gè)細(xì)胞分開，或者是將細(xì)胞從基質(zhì)上移開所需的力量，推算細(xì)胞的粘附性
更新時(shí)間：2026-03-20
訪問(wèn)量：1996
廠商性質(zhì)：其他
細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)（組織→單細(xì)胞懸液）
用途：從組織（血管、肝臟、腫瘤、動(dòng)脈粥樣硬化斑塊、血液）中分離出活的單細(xì)胞，用于流式、培養(yǎng)、分選。
一、試劑耗材
PBS（預(yù)冷）
組z消化液：膠原酶 II / IV（常用 0.1%–0.2%）
或 膠原酶 + 胰m混合消化液
細(xì)胞篩網(wǎng)：70 μm 或 40 μm
離心管、培養(yǎng)皿、剪刀、鑷子
含血清培養(yǎng)基（終止消化）
二、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)流程
1. 取材
無(wú)菌條件下取出組織。
用冷 PBS沖洗，洗掉血污、脂肪、結(jié)締組織。
剪成 1 mm3 左右小碎塊。
2. 消化（最關(guān)鍵）
把碎組織轉(zhuǎn)入離心管，加入預(yù)熱消化液，放入 37℃水浴 消化：
一般組織：30–60 min
疏松組織：20 min
致密組織（斑塊、動(dòng)脈）：1–2 h
期間每隔 5–10 分鐘 輕輕吹打 / 顛倒 一次。
3. 終止消化
加入2–3 倍體積 含 10% 血清的完q培養(yǎng)基，終止消化（血清抑制酶）。
4. 過(guò)濾去殘?jiān)?/h2>用吸管輕輕吹打后，過(guò) 70 μm 細(xì)胞篩，去掉未消化的組織塊，只留單細(xì)胞懸液。5. 離心
轉(zhuǎn)速：1000 rpm（≈6000 g）
時(shí)間：5–8 min
棄上清。
6. 重懸 & 計(jì)數(shù)
轉(zhuǎn)速：1000 rpm（≈6000 g）
時(shí)間：5–8 min
棄上清。
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